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伯樂 CFX96 熒光定量 PCR 儀詳盡介紹
一、產(chǎn)品概述
CFX96 實(shí)時熒光定量 PCR 儀是由 Bio-Rad（伯樂公司）推出的基因擴(kuò)增與定量分析設(shè)備，屬于CFX系列產(chǎn)品之一。該設(shè)備結(jié)合了高精度溫控系統(tǒng)與多通道光學(xué)檢測模塊，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、臨床輔助診斷、食品安全檢測、環(huán)境監(jiān)測及農(nóng)業(yè)遺傳分析等領(lǐng)域。
CFX96 是該系列中的標(biāo)準(zhǔn)96孔通量型號，其設(shè)計(jì)強(qiáng)調(diào)樣品間一致性、數(shù)據(jù)分析靈活性以及操作流程的便利性，適用于高重復(fù)性和中高通量需求的實(shí)驗(yàn)場景。
二、熒光定量PCR技術(shù)原理
熒光定量PCR（Real-Time Quantitative PCR，qPCR）技術(shù)是基于傳統(tǒng)PCR技術(shù)發(fā)展起來的一種實(shí)時檢測擴(kuò)增產(chǎn)物的方法，利用熒光信號變化來監(jiān)控PCR反應(yīng)進(jìn)程。其基本流程包括：
DNA模板擴(kuò)增：通過熱循環(huán)進(jìn)行DNA的指數(shù)擴(kuò)增；
熒光信號采集：在每一循環(huán)末端采集熒光信號，與目標(biāo)擴(kuò)增產(chǎn)物濃度相關(guān)；
數(shù)據(jù)分析：通過Ct值（循環(huán)閾值）與標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算初始模板數(shù)量；
結(jié)果展示：軟件可輸出熔解曲線、擴(kuò)增曲線、相對表達(dá)量分析等數(shù)據(jù)圖譜。
CFX96 將熒光檢測與溫控系統(tǒng)緊密結(jié)合，使用戶能夠?qū)崟r掌握擴(kuò)增反應(yīng)的全過程。
三、CFX96 主要技術(shù)參數(shù)
| 參數(shù)類別 | 技術(shù)指標(biāo) |
|---|---|
| 通量 | 96孔標(biāo)準(zhǔn)PCR板 |
| 每孔反應(yīng)體積 | 10–50 μL |
| 溫控范圍 | 30–100°C |
| 升溫/降溫速率 | 最大5.0°C/s |
| 溫控精度 | ±0.2°C（孔間差異<±0.4°C） |
| 熒光通道 | 標(biāo)準(zhǔn)配備5通道（FAM, HEX/VIC, ROX, Cy5, Quasar 705） |
| 光源 | 固態(tài)LED |
| 檢測器 | 光電二極管陣列 |
| 數(shù)據(jù)輸出 | .xls, .csv, .pdf等格式 |
| 軟件功能 | 多重定量分析、基因分型、熔解曲線分析、相對/絕對定量等 |
| 接口 | USB、以太網(wǎng)口，可遠(yuǎn)程控制與數(shù)據(jù)傳輸 |
四、儀器結(jié)構(gòu)與核心組件
1. 熱循環(huán)系統(tǒng)
CFX96 采用高性能Peltier熱電加熱器，結(jié)合96孔鋁質(zhì)加熱模塊，提供快速且均一的溫度變化，確保所有孔位的擴(kuò)增條件一致。
2. 光學(xué)檢測系統(tǒng)
CFX96 配備多通道熒光檢測系統(tǒng)，通過頂部濾光系統(tǒng)進(jìn)行熒光激發(fā)與信號采集。每個通道配置獨(dú)立LED光源與檢測濾片，可避免信號串?dāng)_，實(shí)現(xiàn)多重靶標(biāo)同步檢測。
3. 軟件平臺（CFX Manager）
用戶可通過CFX Manager軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、運(yùn)行監(jiān)控、數(shù)據(jù)分析及報(bào)告導(dǎo)出。軟件支持自動建模、標(biāo)準(zhǔn)曲線生成、表達(dá)量歸一化和基因分型分析等。
五、應(yīng)用領(lǐng)域
CFX96 適用于以下研究與檢測領(lǐng)域：
1. 分子生物學(xué)研究
基因表達(dá)分析（qRT-PCR）
miRNA定量
轉(zhuǎn)錄因子活性監(jiān)測
2. 臨床檢測研究
病原體核酸定量
腫瘤標(biāo)志物分析
藥物代謝基因檢測
3. 食品安全與農(nóng)業(yè)
轉(zhuǎn)基因成分定量檢測
食源性致病菌篩查
作物基因多態(tài)性研究
4. 環(huán)境微生物分析
水質(zhì)與土壤中微生物DNA定量
環(huán)境抗性基因檢測
六、使用維護(hù)建議
為確保CFX96設(shè)備長期運(yùn)行穩(wěn)定，用戶需關(guān)注以下事項(xiàng)：
日常維護(hù)
使用前檢查熱蓋與光學(xué)組件，避免灰塵污染；
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后清理樣本殘液，保持孔板區(qū)域干燥；
定期校準(zhǔn)光學(xué)系統(tǒng)與溫控模塊。
軟件管理
保持CFX Manager軟件更新至最新穩(wěn)定版本；
定期備份實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及分析報(bào)告；
正確設(shè)定用戶權(quán)限，避免誤操作。
操作規(guī)范
孔板與密封膜選擇需與儀器兼容；
控溫前進(jìn)行熱蓋預(yù)熱，防止冷凝；
熒光通道設(shè)定避免染料重疊，以免影響分析結(jié)果。
七、CFX96 與其他型號對比
| 項(xiàng)目 | CFX96 | CFX384 | ABI QuantStudio 5 | Roche LightCycler 480 |
|---|---|---|---|---|
| 孔數(shù) | 96 | 384 | 96/384（型號不同） | 96/384 |
| 光學(xué)通道 | 5 | 5 | 4/5 | 6 |
| 軟件界面 | 圖形化、模塊化 | 同CFX96 | 依型號變化 | 專業(yè)功能豐富 |
| 優(yōu)勢 | 溫控一致性好，數(shù)據(jù)輸出靈活 | 高通量 | 系統(tǒng)整合度高 | 多重檢測能力強(qiáng) |
八、二手CFX96選購參考建議
由于CFX96耐用性良好，部分實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)讓設(shè)備時狀態(tài)仍較理想。選擇二手設(shè)備時可從以下方面評估：
1. 設(shè)備狀況
樣品孔板是否磨損；
熱蓋開啟是否順暢；
各通道熒光強(qiáng)度是否均一；
檢查系統(tǒng)運(yùn)行是否有報(bào)錯提示。
2. 檢測報(bào)告
要求賣家提供：
溫控一致性報(bào)告；
熒光校準(zhǔn)數(shù)據(jù)；
模擬實(shí)驗(yàn)Ct值穩(wěn)定性測試。
3. 軟件與許可證
確認(rèn)CFX Manager是否可正常安裝與授權(quán)；
如為舊版本，可聯(lián)系Bio-Rad代理了解兼容性問題。
4. 技術(shù)支持
優(yōu)先選擇提供短期質(zhì)保與培訓(xùn)服務(wù)的渠道；
了解是否可購買耗材（如原裝密封膜、孔板）；
確認(rèn)是否兼容現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)室PC環(huán)境。
九、常見問題與解答
Q1：是否可用于多重?zé)晒馓结樂治觯?/strong>
A：可支持5色通道并行檢測，適合常規(guī)TaqMan探針、SYBR Green以及其他染料組合的多重反應(yīng)。
Q2：CFX96是否可進(jìn)行熔解曲線分析？
A：支持熔解曲線檢測，適用于SNP分型、特異性驗(yàn)證等應(yīng)用。
Q3：是否支持遠(yuǎn)程控制？
A：具備網(wǎng)絡(luò)連接功能，通過以太網(wǎng)或局域網(wǎng)可實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程監(jiān)控、數(shù)據(jù)傳輸與操作。
十、結(jié)語
伯樂 CFX96 熒光定量PCR儀作為實(shí)驗(yàn)室常用的實(shí)時擴(kuò)增平臺之一，憑借穩(wěn)定的溫控系統(tǒng)、多色熒光通道、友好的用戶界面，在科研與檢測領(lǐng)域均有廣泛應(yīng)用。對于二手市場的設(shè)備，在合理評估和維護(hù)的前提下，依然可以發(fā)揮可靠性能，滿足多樣化的實(shí)驗(yàn)需求。
