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安捷倫蛋白質(zhì)組學(xué)樣品制備 — MARS 多重親和去除系統(tǒng)
樣本的復(fù)雜程度和蛋白質(zhì)濃度的大跨度動(dòng)態(tài)范圍一直是蛋白質(zhì)組學(xué)研究面臨的最大挑戰(zhàn)，如何減少蛋白樣品的復(fù)雜程度，降低動(dòng)態(tài)范圍，進(jìn)而增加下一步分析的靈敏度和分辨率就成為蛋白質(zhì)組學(xué)流程中樣品前處理的最重要步驟。
比如在血液中，蛋白質(zhì)的豐度差異巨大，跨度可達(dá) 12 個(gè)數(shù)量級(jí)，其中高豐度蛋白如白蛋白、免疫球蛋白 IgG 和 IgA、纖維蛋白原、轉(zhuǎn)鐵蛋白等占比極高，可達(dá) 97-99%。然而，質(zhì)譜技術(shù)在檢測(cè)中存在傾向性，更易識(shí)別相對(duì)豐度較高的蛋白質(zhì)信號(hào)，這使得低豐度蛋白——往往是疾病特異性標(biāo)志物——的檢測(cè)變得困難。為了提升對(duì)這些關(guān)鍵低豐度蛋白的檢測(cè)能力，研究者們正致力于開(kāi)發(fā)預(yù)處理技術(shù)，以降低高豐度蛋白的影響，從而揭示那些在疾病診斷和治療中具有重要意義的低豐度生物標(biāo)志物。這一策略對(duì)于提高疾病診斷的準(zhǔn)確性和深度具有重大意義。
安捷倫 MARS 多重親和去除系統(tǒng)，可用于鑒定和表征血清、血漿和其它生理體液中發(fā)現(xiàn)的高價(jià)值、低豐度蛋白和生物標(biāo)志物。 Mars 多重親和去除系統(tǒng)可重復(fù)而特異性地去除人生理體液中的 14、7 或 6 種高豐度蛋白，以及鼠生理體液中的 3 種高豐度蛋白 (詳細(xì)見(jiàn)如下列表)。
多重親和去除系統(tǒng)選擇指南
Agilent MARS 多重親和去除系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)
高通量處理能力和靈敏度
可一次性去除 14 種、7 種、6 種、2 種或 1 種高豐度蛋白質(zhì)，多達(dá)蛋白總量的 94%-99%。從而將檢出蛋白標(biāo)志物的靈敏度提高至 ng/ml 水平。
高容效性和特異性
特異性抗體與層析介質(zhì)的空間靶向性共價(jià)結(jié)合以及優(yōu)化的結(jié)合洗脫體系保證了最大限度的結(jié)合能力與特定高豐度蛋白的去除。
高重現(xiàn)性和利用率
可利用率高，多達(dá) 200 次以上的高效重復(fù)使用，大大節(jié)省單次實(shí)驗(yàn)的成本。
多選擇性
產(chǎn)品規(guī)格靈活，適合不同實(shí)驗(yàn)室的需求，可提供 HPLC 色譜柱和離心小柱 2 種形式和多種規(guī)格。
強(qiáng)兼容性
與大多數(shù)液相色譜儀器（色譜柱）或臺(tái)式離心機(jī)（離心小柱）完全兼容、實(shí)現(xiàn)無(wú)縫銜接式分析,或者分離樣品可以直接用于 2D、LC/MS 或其它分析技術(shù)的下一步分析。
圖示結(jié)果為同一色譜柱 1、100、150、200 次的分離去除效果的疊加比對(duì)結(jié)果，說(shuō)明 MARS 色譜柱的分離去除的高重現(xiàn)性和利用率
為了保證液相色譜柱和離心小柱的最佳表現(xiàn)，安捷倫提供了使用 Mars 多重親和去除系統(tǒng)液相色譜柱所需要的所有消耗品和附件，以保證色譜柱壽命和樣品重復(fù)性最大化的優(yōu)化條件。
該試劑盒為 4.6 x 50 mm 液相色譜柱處理約 200 份樣品，用 4.6 x 100 mm LC 柱處理約 100 份樣品，和 200 個(gè)離心小柱所用的緩沖液 A 和緩沖液 B。
特殊配方的緩沖液 A 和上樣緩沖液可最大限度地減少蛋白質(zhì)之間的相互作用，以避免由于低豐度蛋白與高豐度蛋白的結(jié)合而導(dǎo)致的不必要的流失。
特殊配方的緩沖液 B，洗脫緩沖液用來(lái)破壞抗體-蛋白之間的相互作用，便于將高豐度蛋白從柱子上洗脫下來(lái)，從而提高色譜柱的使用效率。
MARS 多重親和去除系統(tǒng)配套附件與試劑盒
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