如環(huán)境樣品中的聚酰胺（PA）與天然蛋白的紅外譜圖非常相似，軟件自動區(qū)分難度很大。對于環(huán)境樣品而言，蛋白又是非常難被處理掉的雜質，因此能夠準確區(qū)分 PA 與蛋白則可以成為評價一個微塑料自動化測試方法是否準確的重要因素之一。

我們利用市售的可溯源 PA 及蛋白標準品進行顆粒定性準確度驗證，由于這兩種顆粒在高倍顯微鏡下外觀上存在明顯差別，因此可通過 8700 LDIR 高倍攝像頭的自動拍照功能對顆粒圖像進行二次校對，以確定軟件自動定性結果是否準確。兩種標準品的具體測試信息如圖 1 所示：

為優(yōu)化譜庫自動區(qū)分 PA 及蛋白的能力，首先利用初始譜庫測試了純品蛋白 PA 及純品 PA 的樣品。由于實驗室環(huán)境為非潔凈空間，可能存在污染情況。定性列表如圖 2 左圖所示，在純品蛋白樣品中共檢出 106 個顆粒，其中 65 個顆粒為蛋白，占比約為 60%。樣品中未檢出 PA 顆粒。通過顯微鏡確認均與蛋白顆粒的外觀狀態(tài)不同，如圖 2 右圖所示。

然后按照同樣的方法測試了 PA 標準品。如圖 3 所示，結果中共檢出 2482 種顆粒，其中 1157 顆被鑒定為 PA，而有 729 個顆粒被定性為蛋白，約占總顆粒數(shù)的 29.1 %。但我們通過高清圖像二次確認，被誤識別蛋白的定性結果匹配度都較低，均低于 0.7。

為了提高定性結果準確度，將 30 個被誤判為蛋白的譜圖添加入譜庫中并命名為 PA。利用新建立的譜庫重新選擇一個小區(qū)域進行測試，在測試的 102 個顆粒中，87 個顆粒被定性為 PA，并未發(fā)現(xiàn)蛋白顆粒檢出，如圖 4 所示。

在優(yōu)化譜庫的基礎上，測試了 PA 與蛋白的混標。測試過程中自動采集了每個顆粒的高清圖像，以便于后續(xù)進行準確度交叉驗證。在小區(qū)域測試結果中共檢出 60 個顆粒，其中有 28 顆定性為 PA，23 顆定性為蛋白。經過高清圖像確認，所有 PA 和蛋白均被正確歸類，沒有出現(xiàn)假陽性結果，如圖 5 所示。