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PriCells: 牛或豬大血管原代內(nèi)皮細(xì)胞的分離-灌注酶消化法
PriCells: ?；蜇i大血管原代內(nèi)皮細(xì)胞的分離-灌注酶消化法
實(shí)驗(yàn)材料：
1. ?；蜇i
2. PBS，含青霉素100U/ml和鏈霉素100μg/ml
3. 0.1%Ⅰ型膠原酶
4. 眼科剪，眼科鑷
5. 慕絲線
6. 離心管（15ml、50ml）
實(shí)驗(yàn)方法：
1. 分離牛或豬的主動(dòng)脈等大血管，長(zhǎng)15-20cm，用絲線結(jié)扎血管各分支后，取出主動(dòng)脈。放入含青霉素100U/ml和鏈霉素100μg/ml的PBS中，清洗血管，洗凈血跡。
2. 用眼科剪和眼科鑷剔除血管外膜的脂肪和結(jié)締組織，用加入抗菌素的PBS沖洗三次。
3. 從血管動(dòng)脈端注入0.1%Ⅰ型膠原酶溶液，待血管內(nèi)殘留的PBS全部流出后，結(jié)扎血管靜脈端，繼續(xù)注入膠原酶溶液，使血管充盈。在室溫下消化約30min。
4. 將血管內(nèi)消化液收集到滅菌的離心管內(nèi)，1000r/min，離心10min。吸去上清，加入培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液。調(diào)整細(xì)胞密度至1.5×105個(gè)/ml。
5. PriCells-原代內(nèi)皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基
6. PriCells-原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑
7. PriCells-原代細(xì)胞分離試劑盒