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反相離子對(duì)色譜法檢測(cè)冰淇淋中三聚氰胺
閱讀：486 發(fā)布時(shí)間：2019-4-2摘要
對(duì)于許多食品，人們需要獲悉其中蛋白質(zhì)的含量，但是直接測(cè)定蛋白質(zhì)的含量比較困難，通常通過(guò)測(cè)定氮原子的含量來(lái)間接推算其中蛋白質(zhì)的含量。三聚氰胺（含氮量66%)與蛋白質(zhì)（平均含氮量16%）相比含有更高比例的氮原子，因此被一些造假者利用，添加在食品中以造成食品蛋白質(zhì)含量較高的假象。繼2008年9月國(guó)內(nèi)發(fā)生三鹿奶粉三聚氰胺事件后，伊利雪糕、大白兔奶糖、亨氏米粉、立頓奶茶等奶制品也相繼被檢測(cè)出含有三聚氰胺，嚴(yán)重?fù)p害了國(guó)內(nèi)消費(fèi)者的利益。
本文參考國(guó)標(biāo)GB/T 22388—2008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測(cè)方法中的樣品提取純化過(guò)程，采用反相離子對(duì)色譜法測(cè)定冰淇淋中三聚氰胺含量，重現(xiàn)性好，靈敏度高。
儀器概況
儀器裝置
本實(shí)驗(yàn)使用島津Prominence LC-20A液相色譜儀系統(tǒng)。具體配置為L(zhǎng)C-20AD輸液泵，DGU-20A3在線脫氣機(jī)，SIL-20A自動(dòng)進(jìn)樣器，CTO-20AC柱溫箱，SPD-20A紫外可見(jiàn)檢測(cè)器，CBM-20A控制器和LCsolution色譜工作站。
分析方法
色譜柱：Shimadzu VP-ODS 4.6×250 mm 5um
檢測(cè)波長(zhǎng)：240 nm
流動(dòng)相：緩沖液：乙腈=90：10
（緩沖液配制方法：準(zhǔn)確稱(chēng)取2.10 g 檸檬酸和2.16 g 辛烷磺酸鈉，加入約980 mL 水溶解，調(diào)節(jié)pH 至3.0 后，定容至1L 備用）
流速：1 mL/min
柱溫：40℃
進(jìn)樣量：20 μl
洗脫方式：等度洗脫。
樣品前處理方法
參考國(guó)標(biāo)GB/T 22388—2008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測(cè)方法中的樣品提取純化過(guò)程，具體步驟如圖1所示。
圖1 前處理步驟
分析結(jié)果
1.保留時(shí)間與峰形
圖2為本方法檢測(cè)三聚氰胺標(biāo)樣的典型色譜圖（樣品濃度為0.8 ug/mL）
圖2 三聚氰胺標(biāo)樣圖譜
由圖2可見(jiàn)，本方法所測(cè)三聚氰胺保留時(shí)間為24.40min，峰形尖銳，對(duì)稱(chēng)性好。
2.標(biāo)準(zhǔn)曲線
用流動(dòng)相將三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋得到的濃度為0.8、2、20、40、80 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)工作液，濃度由低到高進(jìn)樣檢測(cè)，以峰面積-濃度作圖，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程(見(jiàn)圖3)。
圖3 校準(zhǔn)曲線
結(jié)果表明，該方法線性良好，相關(guān)系數(shù)為0.9999。
3.實(shí)際樣品分析結(jié)果
按本方法測(cè)定兩份冰淇淋樣品(空白樣品和陽(yáng)性樣品)，得到的圖譜分別如圖4和圖5所示，空白樣品在三聚氰胺出峰處無(wú)基質(zhì)干擾。經(jīng)計(jì)算，陽(yáng)性樣品中三聚氰胺的含量為1.40 mg/kg。
圖5 陽(yáng)性樣品檢測(cè)結(jié)果
結(jié)論
本方法具有儀器成本低，靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，適用于冰淇淋中三聚氰胺含量的準(zhǔn)確測(cè)定。