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干貨∣掌握固相萃取小知識(shí),輕松應(yīng)對(duì)SPE方法開發(fā)

閱讀:2489        發(fā)布時(shí)間:2020/5/23
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填料為正相吸附劑和反相吸附劑主要用來分析哪些化合物呢?

 首先,我們先簡(jiǎn)要了解一下反相萃取與正相萃取的吸附機(jī)理。

 

反相作用機(jī)理:

反相萃取分離主要是利用固相萃取材料官能團(tuán)上的碳?xì)滏I與目標(biāo)化合物的碳?xì)滏I之間的非極性作用力。通常,非極性的反相SPE柱較為適用于從極性基質(zhì)中萃取分離非極性及中等極性的目標(biāo)化合物。

 

對(duì)于通過非極性作用力吸附在非極性SPE柱上的目標(biāo)化合物,可以用具有非極性性質(zhì)的溶劑洗脫,如氯fang、環(huán)己烷、乙酸乙酯等。只要溶劑的洗脫強(qiáng)度足以破壞目標(biāo)化合物與吸附劑非極性官能團(tuán)之間的范德華力,就可以順利地將目標(biāo)化合物從SPE柱上洗脫下來。即便是極性較強(qiáng)的甲醇,對(duì)于許多化合物來說也具有足夠的非極性作用力將其洗脫。有時(shí)單一溶劑不能把疏水性強(qiáng)的目標(biāo)化合物*洗脫下來,則可考慮使用二氯甲烷:乙酸乙酯(1:1,體積比)。

 

反相固相萃取模式下,溶劑體系的極性應(yīng)按照樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序逐漸降低,而它們的洗脫強(qiáng)度逐漸增大。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標(biāo)化合物洗脫,選擇的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標(biāo)化合物的前提下大限度地洗脫干擾物,所選洗脫液應(yīng)能恰好*洗脫目標(biāo)化合物。

 

正相作用機(jī)理:

極性作用力發(fā)生在許多固相萃取材料極性表面與樣品中目標(biāo)化合物的極性官能團(tuán)之間。常見的具有極性作用力的吸附劑在色譜中一般都稱為正相色譜吸附劑。極性作用力的強(qiáng)度比非極性作用力要大,但比離子作用力的強(qiáng)度小。常見的極性官能團(tuán)包括羥基、胺基、巰基等。

 

非極性的基質(zhì)環(huán)境有利于吸附劑和目標(biāo)化合物之間的極性作用力,因?yàn)榉菢O性溶劑沒有能夠與極性固定相材料形成氫鍵的官能團(tuán)。因此,在極性作用力的固相萃取中,樣品的基質(zhì)多為非極性的,如正己烷、二氯甲烷、菜油等,而目標(biāo)化合物多含有極性較大的官能團(tuán)。

 

常見的極性固定相萃取材料包括:硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土及含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2OH)的鍵合硅膠。

 

正相固相萃取模式下,溶劑體系的極性應(yīng)按照樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序逐漸升高,它們的洗脫強(qiáng)度也逐漸增大。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標(biāo)化合物洗脫,選擇的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標(biāo)化合物的前提下大限度地洗脫干擾物,所以洗脫液應(yīng)能恰好*洗脫目標(biāo)化合物。

 

加上之前為大家介紹的離子交換固相萃取技術(shù),現(xiàn)在又面對(duì)反相、正相固相萃取,如此之多的吸附機(jī)制,實(shí)際應(yīng)用中我們?cè)撨x哪一個(gè)呢?下面小編就為大家做一個(gè)具體的分析。

 

由于許多化合物同時(shí)具有多種官能團(tuán),在選擇固相萃取機(jī)理時(shí),應(yīng)該根據(jù)目標(biāo)化合物干擾物的性質(zhì)來考慮采用哪種萃取機(jī)理較為有利。如:2-萘胺是一個(gè)弱堿性化合物(pKa=4.16),在一定的pH條件下還可以呈陽離子狀態(tài),同時(shí)該化合物具有疏水的非極性官能團(tuán)及親水的極性官能團(tuán)。這時(shí),就應(yīng)該根據(jù)樣品基質(zhì)的具體情況來選擇有利于將目標(biāo)化合物與干擾物分離的萃取機(jī)理。如果樣品基質(zhì)中同時(shí)含有大量的非極性干擾雜質(zhì),就應(yīng)該避免采用非極性的萃取機(jī)理,而將樣品的pH調(diào)節(jié)到低于其pKa兩個(gè)pH單位,即pH=2.16,并采用陽離子交換機(jī)理。反之,如果樣品中同時(shí)含有大量的陽離子干擾雜質(zhì),則應(yīng)該調(diào)節(jié)樣品的pH至6.16(高于pKa兩個(gè)單位),采用非極性萃取機(jī)理較為有利。

 

 

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