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當(dāng)您使用氨基柱時(shí)，有沒有遇到在使用一段時(shí)間之后，柱效下降、柱壓升高，使得檢測(cè)結(jié)果逐漸達(dá)不到要求？或者柱子在使用過程中出現(xiàn)異常干擾峰，或者保留時(shí)間出現(xiàn)漂移，與之前的檢測(cè)結(jié)果有較大偏差？又或者是柱子的專一選擇性，使得在特定色譜條件下方法得不到重現(xiàn)，分離度、柱效和拖尾因子達(dá)不到檢測(cè)要求？由于氨基柱的*性，進(jìn)而使用問題較多，這給我們帶來了很多的困擾，那么今天就來談?wù)劙被?/span>

氨基柱的鍵合官能團(tuán)是氨丙基，這種官能團(tuán)比常規(guī)的C18、C8和C4易水解，所以在使用氨基柱之前，我們就要做好心理準(zhǔn)備，氨基柱的使用壽命比常規(guī)色譜柱要短很多。

氨基柱既可以做正相，也可以反相使用，而這兩相溶劑是不能互溶的，所以如果在正反相進(jìn)行切換使用時(shí)，需要用異丙醇進(jìn)行過渡。下面將分別談?wù)劙被谡磧上嘀械氖褂门c維護(hù)注意事項(xiàng)。

反 相

?反相使用時(shí)，如果流動(dòng)相不含有酸堿鹽，做樣結(jié)束直接用100%的乙腈進(jìn)行沖洗和保存即可。若含有酸堿鹽，首先用60%的乙腈水沖洗40min，然后再用100%的乙腈沖洗和保存；

?反相使用時(shí)，注意流動(dòng)相的pH范圍，pH越低越容易水解，理想的pH范圍是3-7，流動(dòng)相中水的比例越高，也越容易水解。

PS：柱子使用后，沖洗后建議保存在純的有機(jī)相中，這樣能獲得良好的保存效果以及延長(zhǎng)柱子的使用壽命。此外如柱子出現(xiàn)了柱壓升高，峰形異常，柱效和分離度下降等異常情況后，可以先用過渡流動(dòng)相沖掉色譜柱的鹽，再分別以做樣流速用100%乙腈→100%甲醇→100%異丙醇→100%乙腈進(jìn)行沖洗，每項(xiàng)沖洗30分鐘，其中異丙醇由于黏度大，所以需要降低流速。

正 相

柱子的沖洗使用100%的正己烷，然后使用正己烷/異丙醇（90/10）進(jìn)行保存。

此外，正相色譜中，固定相的水分含量是影響選擇性的關(guān)鍵參數(shù)，而流動(dòng)相存在的水分含量會(huì)影響到保留時(shí)間和分離度，所以出現(xiàn)保留時(shí)間波動(dòng)較大，可以歸因于固定相和流動(dòng)相中水分的變化，建議對(duì)氨基柱進(jìn)行除水：

?去除固定相中的水分：

用含2.5%二甲氧基丙烷（dimethoxypropane）和2.5%冰醋酸的正己烷沖洗色譜柱30倍柱體積；

?使用水分含量可控的流動(dòng)相（比如水半飽和）：

半飽和流動(dòng)相配置：將無水的非極性流動(dòng)相分成兩半，其中一半中加入一定量水，并混勻攪拌約1小時(shí)，靜止分層后，將多余的水相全部除去，將兩部分重新混合在一起就配成了“半飽和”流動(dòng)相。

PS：如果出現(xiàn)柱壓升高、分離度和柱效下降等異常情況，建議用100%異丙醇→100%甲醇→100%異丙醇以分析流速分別沖洗，每項(xiàng)沖洗40分鐘。同樣，異丙醇沖洗時(shí)需降低流速。

乳糖專用柱

月旭還有一款特殊氨基柱，乳糖專用柱 Xtimate®Lactose-NH2，我們建議采用純乙腈進(jìn)行沖洗和保存，如果柱壓升高，分離度和柱效下降等異常情況，可以用純甲醇→純乙腈→純異丙醇→純乙腈分別進(jìn)行沖洗，每項(xiàng)3小時(shí)。

在使用乳糖專用柱檢測(cè)時(shí)，如果出現(xiàn)噪音增加、漂移增大、分離度達(dá)不到或者柱效不夠等異常情況，需要注意以下幾點(diǎn)：

?流動(dòng)相混合在一起，充分搖勻，真空抽濾，超聲脫氣10分鐘，使用一個(gè)通道運(yùn)行，不要使用在線過濾器；

?進(jìn)樣體積需要嚴(yán)格按照藥典要求，進(jìn)樣10μL，盡可能地將定量環(huán)更換成10μL定量環(huán)，減小柱外死體積的影響，下面左圖和右圖分別是進(jìn)樣20μL和進(jìn)樣量10μL的色譜圖，對(duì)比非常明顯；

?由于示差檢測(cè)器對(duì)溫度的變化比較敏感，建議將柱溫箱用干毛巾或者干的棉花填充，充當(dāng)傳熱介質(zhì)，使得有更好的基線噪音和色譜效果。

由于氨基鍵合官能團(tuán)*的極性，易水解，導(dǎo)致氨基柱的使用壽命較其它常規(guī)色譜柱要短，所以我們需要認(rèn)清這個(gè)事實(shí)。希望以上的使用和維護(hù)方法可以幫到您，極大地延長(zhǎng)氨基柱的壽命。