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10×RealBlot快速轉(zhuǎn)膜液 BL609A 現(xiàn)貨

10×RealBlot 快速轉(zhuǎn)膜液 (10×RealBlot Rapid Transfer buffer) 產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 BL609A 10×RealBlo 快速轉(zhuǎn)膜液 500 ml 產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 快速轉(zhuǎn)膜液使用*配方，能高效快速地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜（PVDF 或硝纖膜）上。 使用濕轉(zhuǎn)法（Tank blot）或半干轉(zhuǎn)法（Semi-dry blot）方法，能在 15-35min 完成轉(zhuǎn)膜過(guò)程。 快速和環(huán)保：快速轉(zhuǎn)膜液不使用甲醇，減輕了對(duì)實(shí)驗(yàn)者和環(huán)境的傷害。 兼容性好：快速轉(zhuǎn)膜液能兼容 Laemmli 膠，預(yù)制膠，Bis-Tris 膠等多種凝膠。 轉(zhuǎn)移效率高：快速轉(zhuǎn)膜液對(duì)分子量跨度較大的蛋白也有很好的轉(zhuǎn)移效率，有效解決了 大小蛋白不能在同一張膜上同時(shí)轉(zhuǎn)移的問(wèn)題。 使用說(shuō)明： 轉(zhuǎn)膜前的準(zhǔn)備： 5-6 張裁好的濾紙；裁好的轉(zhuǎn)印膜；足夠的 1×快速轉(zhuǎn)移 buffer 一 、濕轉(zhuǎn)法（Tank blot）： 1、按照下表配制 1×快速轉(zhuǎn)膜液： 1×快速轉(zhuǎn)膜液配制量 100 ml 500 ml 1000 ml 10×快速轉(zhuǎn)膜液 10 ml 50 ml 100 ml 無(wú)水乙醇 20 ml 100 ml 200 ml 超純水 70 ml 350 ml 700 ml 2、將濾紙和海綿浸泡在 1×快速轉(zhuǎn)膜液中，*浸濕。 3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗 2 分鐘，去除膠表面的 SDS；隨后將凝膠浸泡在 1×快 速轉(zhuǎn)膜液中。 注意：水中漂洗時(shí)間一定不能超過(guò) 2 分鐘，否則分子量較大的蛋白不能*轉(zhuǎn)移。 4、按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu)： 負(fù)極（陰極） 一塊海綿 2mm 濾紙 凝膠 轉(zhuǎn)印膜 1 mm 濾紙 一塊海綿（根據(jù)三明治的厚度選擇是否使用） 正極（陽(yáng)極） 注意：① 要*清除三明治結(jié)構(gòu)中的氣泡，適當(dāng)補(bǔ)加 1×快速轉(zhuǎn)膜液保持三明治結(jié)構(gòu) 濕潤(rùn)。 ② PVDF 膜使用前要用無(wú)水甲醇潤(rùn)濕 30 秒。

③ 三明治結(jié)構(gòu)的制作不能太緊，也不能太松。太緊和太松都會(huì)影響轉(zhuǎn)印效果。如果太 緊的話，可以去除陽(yáng)極一側(cè)的海綿或?yàn)V紙。 5、將三明治結(jié)構(gòu)放于轉(zhuǎn)移槽中。 注：轉(zhuǎn)移槽中可以不用 1×快速轉(zhuǎn)膜液，可以用 1×TGS（Tris-Glycine-SDS）電泳緩沖 液取代。三明治結(jié)構(gòu)中的快速轉(zhuǎn)膜液足夠保證轉(zhuǎn)膜的完成。 二、 半干轉(zhuǎn)（Semi-dry blot）： 1、按照下表配制 1×快速轉(zhuǎn)膜液： 1×快速轉(zhuǎn)膜液配制量 100 ml 500 ml 1000 ml 10×快速轉(zhuǎn)膜液 10 ml 50 ml 100 ml 無(wú)水乙醇 20 ml 100 ml 200 ml 超純水 70 ml 350 ml 700 ml 2、將濾紙浸泡在 1×快速轉(zhuǎn)膜液中，*浸濕。 3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗 2 分鐘，去除膠表面的 SDS；隨后將凝膠浸泡在 1×快 速轉(zhuǎn)膜液中。 注意：水中漂洗時(shí)間一定不能超過(guò) 2 分鐘，否則分子量較大的蛋白不能*轉(zhuǎn)移。 4、按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu)： 負(fù)極（陰極） 下層濾紙 凝膠 轉(zhuǎn)印膜 上層濾紙 正極（陽(yáng)極） 半干轉(zhuǎn)時(shí)，濾紙、膠、膜之間的大小，一般是下層濾紙≧膜≧膠≧上層濾紙。上下兩 層濾紙一定不能接觸；濾紙、膠、膜之間千萬(wàn)不能有氣泡。接觸的濾紙和氣泡會(huì)造成短路。 注意：PVDF 膜使用前要用無(wú)水甲醇潤(rùn)濕 30 秒。 三 、轉(zhuǎn)移條件： 推薦使用恒流轉(zhuǎn)移 電流 轉(zhuǎn)移時(shí)間 電流 轉(zhuǎn)移時(shí)間 300 mA 30 to 35 min 375 mA 20 to 25 min 330 mA 25 to 30 min 400 mA 15 to 20 min 350 mA 25 to 30 min 保存條件： 18-26℃常溫貯存，有效期一年。

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