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食品中粗脂肪含量的測(cè)定（索氏抽提法）

1、目的與要求
1.1 學(xué)習(xí)索氏抽提法測(cè)定脂肪的原理與方法。
1.2 掌握索氏抽提法基本操作要點(diǎn)及影響因素。
2、原理
利用脂肪能溶于有機(jī)溶劑的性質(zhì)，在索氏提取器中將樣品用無(wú)水乙mi或石油mi等溶劑反復(fù)萃取，提取樣品中的脂肪后，蒸去溶劑,所得的物質(zhì)即為脂肪或稱(chēng)粗脂肪。
3、儀器與試劑
3.1 索氏提取器 如圖3-3所示。
3.2 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱。
3.3 干燥器。
3.4 恒溫水浴箱。
3.5 濾紙筒。
3.6 無(wú)水乙mi（不含過(guò)氧化物）或石油mi（沸程30℃～60℃）
4、測(cè)定步驟
4.1 樣品處理
4.1.1 固體樣品: 準(zhǔn)確稱(chēng)取均勻樣品2g～5g（至0.01mg），裝入濾紙筒內(nèi)。
4.1.2 液體或半固體: 準(zhǔn)確稱(chēng)取均勻樣品5g～10g（至0.01mg），置于蒸發(fā)皿中,加入海砂約20g,攪勻后于沸水浴上蒸干,然后在95℃～105℃下干燥。研細(xì)后全部轉(zhuǎn)入濾紙筒內(nèi)，用沾有乙mi的脫脂棉擦凈所用器皿，并將棉花也放入濾紙筒內(nèi)。
4.2 索氏提取器的清洗 
將索氏提取器各部位充分洗滌并用蒸餾水清洗后烘干。脂肪燒瓶在103℃±2℃的烘箱內(nèi)干燥至恒重（前后兩次稱(chēng)量差不超過(guò)2mg）。
4.3 樣品測(cè)定
4.3.1 將濾紙筒放入索氏提取器的抽提筒內(nèi)，連接已干燥至恒重的脂肪燒瓶，由抽提器冷凝管上端加入乙mi或石油醚至瓶?jī)?nèi)容積的2/3處，通入冷凝水，將底瓶浸沒(méi)在水浴中加熱，用一小團(tuán)脫脂棉輕輕塞入冷凝管上口。
4.3.2 抽提溫度的控制：水浴溫度應(yīng)控制在使提取液在每6min～8min回流一次為宜。
4.3.3 抽提時(shí)間的控制: 抽提時(shí)間視試樣中粗脂肪含量而定，一般樣品提取6h～12h，堅(jiān)果樣品提取約16h。提取結(jié)束時(shí)，用毛玻璃板接取一滴提取液，如無(wú)油斑則表明提取完畢。
4.3.4 提取完畢。取下脂肪燒瓶，回收乙mi或石油mi。待燒瓶?jī)?nèi)乙mi僅剩下1～2mL時(shí)，在水浴上趕盡殘留的溶劑，于95℃～105℃下干燥2h后，置于干燥器中冷卻至室溫，稱(chēng)量。繼續(xù)干燥30min后冷卻稱(chēng)量，反復(fù)干燥至恒重（前后兩次稱(chēng)量差不超過(guò)±2mg）。
5、結(jié)果計(jì)算
5.1 數(shù)據(jù)記錄表
樣品的質(zhì)量m/g 脂肪燒瓶的質(zhì)量m0/g 脂肪和脂肪燒瓶的質(zhì)量(m1)(單位：g)
次 第二次 第三次 恒重值

5.2 計(jì)算公式
X（％）= ×100
式中：X—樣品中粗脂肪的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)，單位(％)。
m—-樣品的質(zhì)量, 單位(g)；
m0 —脂肪燒瓶的質(zhì)量, 單位(g)；
m1 —脂肪和脂肪燒瓶的質(zhì)量, 單位(g)。
6、注意事項(xiàng)
6.1 抽提劑乙mi是易燃，易爆物質(zhì)，應(yīng)注意通風(fēng)并且不能有火源。
6.2 樣品濾紙筒的高度不能超過(guò)虹吸管，否則上部脂肪不能提盡而造成誤差。
6.3 樣品和醚浸出物在烘箱中干燥時(shí)，時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)，以防止不飽和的脂肪酸受熱氧化而增加質(zhì)量。
6.4 乙mi若放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)產(chǎn)生過(guò)氧化物。過(guò)氧化物不穩(wěn)定，當(dāng)蒸餾或干燥時(shí)會(huì)發(fā)生爆炸，故使用前應(yīng)嚴(yán)格檢查，并除去過(guò)氧化物。
6.4.1 檢查方法：取5mL乙mi于試管中，加KI(100g/L)溶液1mL，充分振搖1min。靜置分層。若有過(guò)氧化物則放出游離碘，水層是黃色（或加4滴5 g/L淀粉指示劑顯藍(lán)色），則該乙mi需處理后使用。
6.4.2 去除過(guò)氧化物的方法：將乙mi倒入蒸餾瓶中加一段無(wú)銹鐵絲或鋁絲，收集重蒸餾乙mi。
6.5 反復(fù)加熱可能會(huì)因脂類(lèi)氧化而增重，質(zhì)量增加時(shí)，以增重前的質(zhì)量為恒重。