關鍵詞:核酸提取與純化|實驗技術服務
簡介：世界*品牌核酸提取與純化|實驗技術服務原裝，質量保證,*。
核酸提取與純化|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧，承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信，我們提供原始的表達菌株和克隆質粒，客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌：   http://www.。。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程：
1.核酸的提取
核酸都溶于水，而不溶于有機溶劑，利用此性質進行提取。在細胞內DNA與蛋白質結合成脫氧核糖核蛋白（DNP），RNA與蛋白質結合成核糖核蛋白（RNP），在不同濃度的鹽溶液中它們的溶解度差別很大，DNP在純水或1 mol/LNaCl溶液中溶解度較大，但在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度很低，相反，RNP易溶解。因此，用0.14mol/LNaCl溶液可簡單地初步分開DNP和RNP。
在分離核酸中zui困難的是將核酸與緊密結合的蛋白質分開，而且還要避免核酸的降解。常用的解離劑是陰離子去垢劑，如脫氧膽酸鈉，十二烷基硫酸鈉（SDS），４－氨基水楊酸鈉和萘－1，5－二磺酸鈉等，它們具有溶解病毒、細菌的作用，可使核酸從蛋白質上游離出來，還具有抑制核糖核酸酶的作用。另外除去核酸中的蛋白質的一個有效辦法是用酚－氯仿混合液，它們可使蛋白質變性，并對核糖核酸酶有抑制作用，另外氯仿比重大可使有機相和水相*分開，減少殘留在水相中的酚。在用酚－氯仿抽提核酸提取液時，還須要劇烈振搖，為防止起泡和促使水相與有機相的分離，在酚－氯仿抽提液中再加上一定量的異戊醇。
2. 核酸的純化
核酸的純化zui關鍵步驟是去除蛋白質，通常只要用酚／氯仿、氯仿抽提核酸的水溶液即可。每當需要把DNA克隆操作的某一步所用的酶滅活或去除以便進行下一步時，可進行這種抽提。然而，如果從細胞裂解液等復雜的分子混合物中純化核酸，則要先用某些蛋白水解酶消化大部分蛋白質后，再用有機溶劑抽提。這些廣譜的蛋白酶包括鏈霉蛋白酶及蛋白酶Ｋ等，它們對多數(shù)天然蛋白質均有活性。
用酚／氯仿抽提：這兩種有機溶劑合用，比單獨用酚抽提除蛋白效果更佳。繼而用氯仿抽提則可除去核酸制品中的痕量酚。具體步驟如下：
①核酸樣品置有蓋小離心管中，加入等體積的酚／氯仿；②旋渦混勻管內容物，使呈乳狀；③12000ｇ室溫離心15ｓ；④水相移入另一離心管，棄去兩相界面和有機相；⑤重復步驟①～④，直至兩相界面上無蛋白質為止；⑥加入等體積的氯仿并重復②～④步操作；⑦按下述核酸濃縮法沉淀回收核酸。
3.核酸的濃縮
應用zui廣的核酸濃縮法是乙醇沉淀法。在中等濃度單價陽離子存在下，加入一定量的乙醇后，所形成的核酸沉淀可經離心而回收。甚至對低至ｐｇ（皮克）量的DNA或RNA，也可定量回收?；厥盏暮怂峥砂此铦舛龋偃苡谶m當?shù)木彌_液中。具體操作時，可向含樣品的小離心管中加入單價陽離子鹽貯存液。單價陽離子鹽的選擇，主要基于下述考慮：用醋酸銨可減少dNTP的共沉淀，但在以后要作核酸的磷酸化時應避免用醋酸銨，因銨離子是多核苷酸激酶的強烈抑制劑。當用較高濃度的乙醇沉淀RNA時，常用LiCl，因LiCl在乙醇中溶解度很高，不隨核酸共沉淀。含有SDS的核酸樣品，應使用NaCl，這時該去垢劑在70％乙醇中仍保持可溶。
DNA和RNA的沉淀，大多使用醋酸鈉（pＨ5.2）。
產品組成:
集液管
核酸純化柱的集液管由醫(yī)療級的聚丙烯制成，容量為2ml和50ml。
Column
核酸純化柱的column由醫(yī)療級的聚丙烯制成，底部為網狀或帶接口，容量約為1ml或25ml。
墊片
核酸純化柱的墊片為特殊纖維材料，耐受酸堿和大部分的有機溶劑，對大部分的生物分子不會產生吸附。
濾膜
經過特別優(yōu)化的進口原料的硅膠膜或者玻璃纖維膜，zui大程度的吸附核酸分子。