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生物顯微鏡相關(guān)工作參數(shù)

閱讀:2561      發(fā)布時間:2018-10-29
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       數(shù)值孔徑(NA)

       數(shù)值孔徑簡寫NA,數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要技術(shù)參數(shù),是判斷兩者(尤其對物鏡而言)性能高低的重要標(biāo)志。其數(shù)值的大小,分別標(biāo)刻在物鏡和聚光鏡的外殼上。它是物鏡前透鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率(n)和孔徑角(u)半數(shù)的正弦之乘積。用公式表示如下:NA=nsinu/2。它與分辨率成正比,與放大率成正比,與焦深成反比,NA值增大,視場寬度與工作距離都會相應(yīng)地變小。

  數(shù)值孔徑(NA) 分辨率

  ·分辨率

  顯微鏡的分辨率是指能被顯微鏡清晰區(qū)分的兩個物點的zui小間距,又稱"鑒別率"。其計算公式是σ=λ/NA 式中σ為zui小分辨距離;λ為光線的波長;NA為物鏡的數(shù)值孔徑??梢娢镧R的分辨率是由物鏡的NA值與照明光源的波長兩個因素決定。

  ·放大率和有效放大率

  經(jīng)過物鏡和目鏡的兩次放大,所以顯微鏡總的放大率是物鏡放大率和目鏡放大率的乘積,顯微鏡放大倍率的極限即有效放大倍率。

  ·焦深

  焦深為焦點深度的簡稱,即在使用顯微鏡時,當(dāng)焦點對準(zhǔn)某一物體時,不僅位于該點平面上的各點都可以看清楚,而且在此平面的上下一定厚度內(nèi),也能看得清楚,這個清楚部分的厚度就是焦深。焦深大, 可以看到被檢物體的全層,而焦深小,則只能看到被檢物體的一薄層.

  焦深 目鏡的視場

  ·視場直徑

  所看到的明亮的圓形范圍叫視場,它的大小是由目鏡里的視場光闌決定的。視場直徑也稱視場寬度,是指在顯微鏡下看到的圓形視場內(nèi)所能容納被檢物體的實際范圍。視場直徑愈大,愈便于觀察。

  視場直徑=目鏡視場數(shù)/物鏡倍率

  ·覆蓋差

  由于蓋玻片的厚度不標(biāo)準(zhǔn),光線從蓋玻片進入空氣產(chǎn)生折射后的光路發(fā)生了改變,從而產(chǎn)生了相差,這就是覆蓋差.上規(guī)定,蓋玻片的標(biāo)準(zhǔn)厚度為0.17mm,許可范圍在0.16-0.18mm,在物鏡的制造上已將此厚度范圍的相差計算在內(nèi)。物鏡外殼上標(biāo)的0.17,即表明該物鏡所要求的蓋玻片的厚度。

  ·工作距離(WD)

  工作距離也叫物距,即指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離。

  工作距離

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