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中級(jí)會(huì)員 | 第15年

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抗體保存注意事項(xiàng)和保存條件

時(shí)間:2024/4/23閱讀:449
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抗體保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當(dāng),大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。以abcam 抗體保存方法為主,同樣也可以應(yīng)用到其他絕大部分的抗體產(chǎn)品!

1. 收到抗體后請(qǐng)務(wù)必在12000rpm 離心1-5min 后再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存!質(zhì)優(yōu)的抗體使用非常特殊的儲(chǔ)存管,只有在12000rpm 離心1-5min 才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來。即使是在10000rpm 離心也會(huì)導(dǎo)致離心不wan全,導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象!

2. 對(duì)于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20 度 or -80 度對(duì)絕大多數(shù)抗體來說,保存在-20 度是完wan全足夠了。沒有任何證據(jù)顯示保存在-80度 會(huì)有更多的好處!

(1) 分裝可以最da程度的降低反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害,同時(shí)也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。

(2) 分裝的量以一次實(shí)驗(yàn)用完為好,最少不能少于10ul 每份。因?yàn)榉盅b體積越小,抗體的濃度越可能會(huì)受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響

(3) 復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4 度,避免再凍起來!

(4) 抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,在4 度 盡量不要超過1 天。

(5) 避免將抗體保存在自動(dòng)除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門上

3. 大部分抗體收到后4 度短暫保存1-2 周對(duì)抗體活性是沒有影響的。

如果抗體很快(1-2 周)會(huì)使用,推薦在4 度保存,這是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害。

如果要長(zhǎng)期保存則最好是在-20 度 or -80 度。最關(guān)鍵的一點(diǎn)是要根據(jù)說明書推薦的方式來正確的保存抗體!但是,腹水形式的產(chǎn)品請(qǐng)?jiān)谑盏胶罅⒓磧銎饋恚∫驗(yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長(zhǎng)期在4 度保存會(huì)導(dǎo)致抗體的降解!

4. 大部分抗體的運(yùn)輸條件:一般的運(yùn)輸過程需要1-2 周的時(shí)間,所以是在4 度的條件下來完成的。4 度運(yùn)輸最主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時(shí)抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運(yùn)輸過程中避免干冰運(yùn)輸!

特殊抗體的保存條件:

1. 酶聯(lián)抗體:永遠(yuǎn)保存在4 度,避免凍起來。否則會(huì)導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失

2. 偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對(duì)光極為敏感,因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的!

3. IgG3 的同型對(duì)照:永遠(yuǎn)保存在4 度,避免凍起來。因?yàn)槿绻霈F(xiàn)凍融過程,該抗體非常容易形成多聚體無論是保存還是運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融!反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體變性,導(dǎo)致多聚體形成,從而降低抗體的結(jié)合能力!

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