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葡萄糖氧化酶測(cè)試盒樣品的制備與測(cè)定

閱讀:1262      發(fā)布時(shí)間:2021-7-13
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  葡萄糖氧化酶廣泛存在于動(dòng)物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生H2O2,是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。

  葡萄糖氧化酶測(cè)試盒具有質(zhì)量可靠、*、效果精定、靈教度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)。

  試劑的組成配制

  提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

  試劑一:液體 19.2mL×1 瓶,4℃保存;

  試劑二:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

  試劑三:液體 1mL×1 支,4℃保存;

  樣品測(cè)定的準(zhǔn)備

  組織處理:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

  血清(漿):直接檢測(cè)。

  葡萄糖氧化酶測(cè)試盒測(cè)定步驟

  1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至500nm,蒸餾水調(diào)零。

  2、GOD 檢測(cè)工作液的配制:用時(shí)將試劑二和試劑三轉(zhuǎn)移至試劑一中,充分混勻,待用。

  3、測(cè)定前將GOD檢測(cè)工作液在37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)水浴10min以上。

  4、在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本和240μL工作液,立即混勻并計(jì)時(shí),記錄500nm下20s吸光值A(chǔ)1和1min20s后的吸光值A(chǔ)2。計(jì)算ΔA=A2-A1。

 

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