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技術(shù)文章

基因芯片技術(shù)和DNA測序

閱讀:1279          發(fā)布時(shí)間:2011-1-4

基因芯片技術(shù)是綜合利用一系列微電子技術(shù),在有限的空間內(nèi)將核酸探針點(diǎn)到固相載體上,或者直接進(jìn)行探針固相原位合成,將一系列可尋址識別的核酸探針有序集成起來,用于同時(shí)進(jìn)行眾多的顯微核酸雜交反應(yīng),可以同時(shí)檢測很多種核酸片段?;蛐酒雌渲谱髟砜梢苑譃楹芏囝?,但目前真正成熟的,得以廣泛應(yīng)用的仍只有使用點(diǎn)樣或原位合成技術(shù)的微陣列(microarray)技術(shù)。

 
    基因芯片檢測的生物學(xué)原理和前面所述的核酸探針*相似,所以可以說基因芯片就是高密度的斑點(diǎn)雜交技術(shù)。但正因?yàn)槠涓呙芏龋瑢?dǎo)致了一個(gè)量變到質(zhì)變的過程,成為炙手可熱的一種新生物技術(shù)。
 
    基因芯片與檢驗(yàn)檢疫醫(yī)學(xué)關(guān)系密切,它為檢驗(yàn)檢疫工作提供了一種全新的技術(shù),使一些檢驗(yàn)檢疫工作中難解決的問題成為可能?,F(xiàn)有的檢驗(yàn)檢疫方法大多數(shù)只是檢測單一因素或單一種類的疫病,但由于人體和疾病的復(fù)雜性,單一因素或單一種類的疫病的檢測在很多情況下有很強(qiáng)的局限性,而芯片技術(shù)提供了一種大大突破這種局限性的解決思路,因?yàn)樗軌蛲瑫r(shí)檢測很多種因素和很多種疫病。
 
    下面以一款呼吸道疾病通用檢測芯片為例介紹一下基因芯片在檢驗(yàn)檢疫中的應(yīng)用:①將呼吸道的各種致病菌特征基因片段全部制作成探針,有序點(diǎn)制到固相載體上,制成芯片;②提取樣品中的核酸,并對核酸進(jìn)行特異性或非特異性的擴(kuò)增;③將擴(kuò)增產(chǎn)物與芯片雜交檢測;④分析檢測結(jié)果,判定樣品中含有哪些病原微生物。
 
    目前,基因芯片短期內(nèi)仍難以在動物檢驗(yàn)檢疫得到廣泛應(yīng)用。其原因有:①檢測的靈敏度需要加強(qiáng);②檢測的質(zhì)控體系有待完善;③檢測的成本太高。
 
    DNA測序傳統(tǒng)的方法是Maxam和Gilbert的化學(xué)法及Sanger的末端鏈終止法,但隨著分子生物學(xué)的飛速發(fā)展,尤其是近年來人類基因組測序(HGP)和其他眾多基因組測序工作的完成,大規(guī)模測序的技術(shù)日臻成熟。
 
    DNA測序?qū)τ趧游餀z驗(yàn)檢疫工作而言,一般是用于對上述各種方法的進(jìn)一步確認(rèn),而這種確認(rèn)往往是不必要的,所以只是在上述方法出現(xiàn)模棱兩可的情況時(shí),才考慮DNA測序進(jìn)行確認(rèn)。

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